代谢组专题___特殊动物类样本准备_保存及运送方式
原创 小博 中康博生物 2025-06-17 11:45 北京
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代谢物提取的质量受多种因素的综合影响,包括物种及组织部位的选择、样本制备的规范性、样本交接的及时性、提取方法与操作的准确性,以及实验环境的稳定性等。因此,尽管我们会尽力确保提取质量,但无法完全做到绝对保证。望老师理解,并提前做好组织样本的备份工作,以应对可能出现的意外情况。
为了尽可能保障获取质量较高的代谢物样本,恳请老师务必按照以下指导原则来准备样本。
Part.01
尿液
1. 预先配置叠氮化钠工作液(0.5mg/L),于-20℃保存。
2. 晨起中段尿(临床)或晨间 1 小时尿(动物)直接分装到离心管中,每管 1mL ,并添加 10μL 叠氮化钠工作液。-80℃冻存寄送。
3. 若叠氮化钠获取困难可用 1000rpm 、4℃离心 5 分钟,0.22μm 滤膜过滤方法代替。
注意事项:
1. 动物 1 小时尿量不够,可分多次收集,如果需要收取 24h 尿液,请使用带有低温装置的 代谢笼收取,并添加叠氮化钠。
2. 叠氮化钠的作用是防腐杀菌,有毒,请万分小心。
Part.02
精液
1. 所有动物都是在相同的管理条件下饲养的,并得到相同的营养。收集 1mL 的精液样本。
2. 采样后立即 4℃、3000rpm 下离心 10min。
3. 分装上清液至 1.5mL 离心管中,液氮淬灭,-80℃低温保存,足量干冰寄送。
Part.03
肺泡灌洗液
1. 采集 1ml 肺泡灌洗液样本于离心管中,4℃下 6000g 离心 10min。
2. 2.收集上清液,分装到 1.5ml 离心管中,放入液氮 30s。
3. -80℃冻存。足量干冰寄送。
注意事项:
1.样本收集时仔细操作,避免污染。 2.全程在低温下快速进行。
3.将样本分装以便多次实验。
Part.04
腹腔渗透液
1. 收集 1mL 渗出液样本,4℃、3000rpm 下,离心 10min。
2. 分装上清液至 1.5mL 离心管中,-80℃冻存,干冰寄送。
注意事项:
1. 样本收集时仔细操作,避免污染。
2. 全程在低温下快速进行。
3. 将样本分装以便多次实验。
Part.05
瘤胃液
1. 采集 1ml 瘤胃液样本于离心管中,6000g 室温离心 15min。
2. 收集上清液,用一次性 0.22um 无菌滤膜过滤。
3. 收集滤液分装到 1.5ml 离心管中,-80℃冻存,干冰寄送。
Part.06
卵泡液
1. 将收集到的卵泡液立即 3000g 、4℃下离心 20 分钟,取上清分装到 1.5mL 离心管中,每 管 0.2mL。
2. -80℃冻存。足量干冰寄送。
注意事项:
1. 样本收集时仔细操作,避免血液污染。
2. 取样时如用麻醉剂,建议用异氟醚,防止在 NMR 血清谱图中出现干扰峰。
3. 强烈